蓝白斑筛选,蓝白斑筛选培养基

金汇小助手 网友投稿 2023-01-23 24 0

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同时T载体的测序引物比较明确商业化的缘故,因此测序也方便一些更重要的是,T载体往往设计了蓝白斑筛选的功能,插入片段的载体会呈现白色,这样也容易区分验证,不用每个单菌落都拿去做colony PCR或提质粒酶切验证当然。

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你是在说蓝白斑筛选吧~培养基中本身就有抗生素,转了质粒含抗性基因的细菌才能在培养基上长出来而外源基因是插入在lacZ的α片段基因里面,所以插入了外源片段的质粒导入细菌后,细菌不能表达β半乳糖苷酶,所以。

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这种重组子的筛选,称为蓝白斑筛选缺点 由于多种原因,一些白色菌落可能不包含所需的重组质粒连接的 DNA 可能不是正确的或未正确连接的,并且某些线性化载体可能被转化,其末端“修复”并连接在一起,从而不会产生 LacZ。

IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质基于这个特性,当pUC系列的载体DNA或其他带有lacZ 基因载体DNA以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–。

不能,因为没有lacZ的alpha片段编码基因大多数表达载体为了高效表达目的蛋白,会避免插入其它不是必需的编码序列参考资料htm。

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